نام آزمایش :
اندازه گیری پروتئین به روش بیوره
بیوره ساختمانی شبیه به پروتئین دارد که در محیط قلیایی می تواند محصول بنفش یا آبی رنگ بدهد که در 540nm بیشترین جذب را دارد.
هدف از انجام آزمایش :
وسایل مورد نیاز :
لوله های آزمایشگاهی با برچسب های B – T – S1 – S2 – S3 دستگاه شیکر – پیپت – دستگاه اسپکترو فوتومتر
نحوهی انجام آزمایش :
در ابتدای کار به کمک جدول زیر شروع به ساخت لوله های B و T میکنیم :
|
|
B |
T |
S1 |
S2 |
S3 |
|
H2O |
1 |
-- |
-- |
-- |
-- |
|
نمونه مجهول |
-- |
1 |
-- |
-- |
-- |
|
استاندارد |
-- |
-- |
1 |
1 |
1 |
|
بیوره |
3 |
3 |
3 |
3 |
3 |
به کمک پیپت 1 ccاز لوله بلانک را کشیده و درون لوله B میریزیم و سپس مقدار 3 cc از بیوره را نیز داخل لوله می ریزیم ، سپس برای ساخت لوله تست cc1 از نمونه مجهول و cc 3 از بیوره را داخل لوله Tمی ریزیم .
در ادامه کار نیاز به ساخت استاندارد داریم که به کمک جدول زیر شروع به ساخت استاندارد می کنیم :
CS=10
|
2 |
4 |
6 |
8 |
10 |
|
|
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
استاندارد |
|
5 |
4 |
3 |
2 |
1 |
محلول |
پس از ساخته شدن استاندارد ها به کمک پیپت شروع به ساخت لوله های استاندارد اصلی خود می کنیم که طبق جدول بالا در هر کدام از سه لوله 1cc از استاندارد و 3cc از بیوره را میریزیم .در ادامه لوله ها را به کمک دستگاه شیکر خوب مخلوط می کنیم و در آخر حدود (15-10) دقیقه در محیط آزمایشگاه قرارشون میدهیم و سپس با طول موج 540nm ان ها را در دستگاه اسپکترو فوتومتر قرار می دهیم .
نتیجه آزمایش :
t=123 s1=471 s2=406 s3=302
Ct3=2/44 ct2=2/42 ct1=2/61
2/49:میانگین