نام آزمایش:اندازه گیری اوره به روش دی استیل منو اکسیم

هدف: محاسبه ی میزان اوره فرد بیمار

وسایل مورد نیاز:سه لوله ی آزمایشگاهی با برچسب های S-T-B-پیپت-آب مقطر- نمونه مجهول- محلول شماره 1(دی استیل)- محلول شماره  2(محلول اسیدی)- دستگاه شیکر- دستگاه  بن ماری- دستگاه اسپکترو فوتومتری.

روش انجام کار: روش دی استیل منواکسیم:روشی است که دی استیل درحضور محیط  اسیدی وحرارت با اوره ترکیب شده و کمپلکس رنگی را می سازد که بر اساس شدت رنگ این کمپلکس اوره را اندازه گیری میکنیم.

                                   کمپلکس                             اوره                                     دی استیل

ابتدا به کمک پیپت، 05/0از محلول استاندارد را کشیده و داخل ظرف با برچسب S می ریزیم سپس از نمونه  مجهول به همان  مقدار داخل  لوله ی T می ریزیم از محلول آب مقطر نیز به همان مقدار داخل لوله ی B می ریزیم.

در مرحله بعد هر یک از لوله های B - T - Sرا به اندازه ی 5/1 سی سی  از محلول های شماره ی  1 و 2 پر می کنیم و لوله ها را در دستگاه شیکر وارد می کنیم.

دستگاه شیکر:دستگاهی است لرزاننده به منظور مخلوط شدن مواد با یکدیگر .

پس از اینکه مواد  به خوبی  با هم مخلوط گشتند لوله ها را وارد دستگاه بن ماری میکنیم.

دستگاه بن ماری:دستگاهی است باحوضچه استیل که با آب پر میشود وظروف مختلف آزمایشگاهی درون آن قرار می گیرد . حرکت  همرفتی گرما  در آب از حرارت مستقیم شعله جلوگیری کرده و سبب ایجادحرارت یکنواخت و قابل کنترل در بن ماری می شود.

پس از گذشت ده دقیقه لوله ها ی آزمایشگاهی را از دستگاه خارج کرده و زیر آب سرد می گیریم.در این مرحله مشاهده می کنیم لوله های SوTبه رنگ قرمز ولوله  Bبه رنگ زرد کم رنگ در آمده اند. پس از سرد شدن لوله ها،آن ها را در دستگاه اسپکتروفوتومتری قرار میدهیم.

دستگاه اسپکتروفوتومتری:دستگاهی است برای اندازه گیری غلظت ماده رنگی محلول هاکه ازدو قسمت اسپکترو متر و فوتومترتشکیل شده است، اسپکترومتر نور ثابت را با طول موج دلخواه به وجود می آورد ،پس ازعبور نور از محلول ،نور باقیمانده به قسمت نورسنجی یا فتومترمیرود ونور را به سیگنال الکتریکی تبدیل می کند ، سپس سیگنال های تشکیل شده اندازه گیری و پردازش می شوند تا کمیت به دست آید.

اصول آزمایش:

در هنگام  استفاده از پیپت باید به حجم آن  توجه  کرد ، در این آزمایش از پیپت 2/0 و5سی سی استفاده شد،به منظور نتیجه گیری بهتراز این آزمایش،پیپت ها  پس از هر بار استفاده تمیز وخشک گردند یا از چند پیپت استفاده گردد.

در دستگاه اسپکترو فوتومترابتدا لوله کوت را از محلول لوله ی بلانک پر کرده و داخل دستگاه می گذاریم و دستگاه را صفر میکنیم (یعنی در این حالت کل نور تابیده شده به کوت خارج گشته و جذبی صورت نمی گیرد)  ، سپس محلول داخل لوله کوت را خارج کرده و آن را از محلول لوله Tپر میکنیم و مجدد ان را وارد دستگاه میکنیم،عدد به دست آمده را ثبت نموده و لوله کوت را خالی کرده و آن را از محلول لوله S  پر میکنیم و وارد دستگاه کرده عدد نشان داده شده را ثبت میکنیم.

نتایج:                                                               

                                                      417  =  مقدار نور جذب شده توسط محلولT            

                                                      874 =   مقدار نور جذب شده توسط محلول S

                                                        30  =     Cs

                                                     Ct=  =    فرمول   

                                                             =       CT

به منظور تبدیل ازت اوره به اوره عدد حاصل از فرمول بالا رادر 14/2 ضرب میکنیم.                

                                                       21/45 =  14/2  × 13/21                                                            

 

نام آزمایش : اندازه گیری گلوکز به روش آنزیمی

 

هدف از آزمایش : بررسی میزان گلوکز نمونه مجهول

 

وسایل مورد نیاز : سه لوله با بر چسب  S1 - S2 - S3 _دو لوله با برچسب B وT _معرف رنگ زا _نمونه مجهول _آب مقطر _استاندارد _ سه لوله با برچسب s1-s2-s3

 

روش انجام کار :

 

	B	T	S1	S2	S3
آب مقطر	02/0	___	___	___	___
نمونه مجهول	___	02/0	___	___	___
استاندارد	___	___	02/0	02/0	02/0
معرف رنگزا	2	2	2	2	2

 

از آنجایی که طبق جدول ما باید 02/0استاندارد بسازیم و این کار از دقت بالایی بر خور دار است وگاها میسر نیست در سه لوله  s1- s2 - s3 طبق جدول زیر استاندارد سازی کرده  و سپس از این نمونه ها مقدار  02/0  را وارد  لوله های اصلی می کنیم .                           

0	50	100	150	200
0	1	2	3	4
4	3	2	1	0

                                                                     cs=200                 

 

در ادامه معرف رنگ زا را به مقدارcc2 به هر کدام از لوله های استاندارد خود اضافه می کنیم و سپس اقدام به ساخت لوله بلانک و تست خود به روش زیر می کنیم :

برای ساخت لوله بلانک 02/0 از آب مقطر وcc2 از معرف رنگ زا می ریزیم و برای ساخت لوله تست 02/0 از نمونه مجهول و  cc2  از معرف رنگ زا را در لوله می ریزیم . (لازم  به ذکر است برای کشیدن مقدار 02/0  که مقدار کمی است از وسیله ای به نام سم پلر استفاده می کنیم .)

بعد از ساخت  لوله ها آن ها را به کمک دستگاه  شیکر مخلوط  کرده و بعد از ده دقیقه  ماندن در حرارت 37  درجه یا همان حرارت آزمایشگاه به سراغ  دستگاه اسپکترو فوتومتری می رویم : این دستگاه از دو قسمت اسپکترو متر و فوتو متر تشکیل شده است وبرای اندازه گیری غلظت ماده رنگی به کار می رود ،اسپکترو متر نور ثابت را با  طول  موج  دلخواه به وجود می آورد ، پس از عبور نور از محلول ، نور باقی مانده به  قسمت نور سنجی  یا  فوتو متر می رود و نور را به سیگنال الکتریکی   تبدیل می کند ، سپس سیگنال های تشکیل شده اندازه گیری  و پردازش میشوند تا کمیت به دست آ ید.

 

دستگاه را روی طول موج 530- 510 گذاشته ولوله بلانک را داخل دستگاه می گذاریم و دستگاه را صفر می کنیم ( کل نور تابیده شده به لوله خارج گشته و جذبی صورت نمی گیرد.)

 

اعداد به دست آمده از این آزمایش عبارتند از :

 S1=612   S2=406    S3=237    S4=133    T=175             

 

           Ct1=57/1   ct2=86/2   ct3=147/6   ct4=263/1          

                                                     5/138=میانگین

از آنجایی که میزان گلوکز عادی در حدود 60-125است پس نمونه ما با افزایش گلوکز همراه بوده است.

 

نام آزمایش : رنگ آمیزی گرم    (gram staining)

 

 

هدف از آزمایش  : یادگیری نحوه انجام آزمایش وتشخیص  مرفولوژی و آرایش سلولی و مشاهده ی  واکنش باکتری به این رنگ آمیزی .

 

وسایل مورد نیاز : نمونه ای  که  از گلو گرفته  شده  است – سو آب –  چراغ مطالعه – لام –  شعله –  مواد رنگ آمیزی گرم  شامل : رنگ کریستال ویوله (بنفش تیره) ، محلول لوگل  ، محلول  الکل  استن ، رنگ  سافرانین(قرمز) ،- روغن  ایمرسیون – میکروسکوپ

 

روش انجام کار :

ابتدا از لوزه های فرد یک نونه می گیریم و آن را روی لام پخش می کنیم،مدتی صبر می کنیم تا کاملا خشک شود سپس به کمک شعله آن را فیکس می کنیم به طوری که میکروب ها کشته نشوند (بهتر است سه بار به صورت ملایم ازروی شعله عبور داده شوند ).

 

 در ادامه نوبت به رنگ آمیزی می رسد که لام را روی سکو های رنگ آمیزی گذاشته و رنگ کریستال ویوله را به مدت ( 2-1) دقیقه روی لام قرار می دهیم ، بعد از گذشت زمان مورد نیاز ، رنگ را می شوییم و محلول لو گل را به منظور تثبیت رنگ به مدت(2-1)دقیقه روی لام قرارمیدهیم و پس از آن لام را میشوییم ، سپس محلول الکل استون رابه مدت 12 ثانیه روی لام میریزیم و دوباره آن را میشوییم ،در آخر نوبت به رنگ سافرانین می رسد، که این رنگ را نیز به مدت  20  ثانیه روی لام قرار داده و سپس می شوییم.

 

بعد از مراحل نام برده لام را در محلی می گذاریم تا خشک شود ، پس ازخشک شدن یک  قطره  روغن ایمرسیون را به طوری که حباب نداشته باشد روی لام میریزیم وآن را زیر میکروسکوپ قرار می دهیم ، میکروسکوپ را تنظیم کرده تا نمونه رنگ آمیزی شده را مشاهده کنیم .

 

نتیجه ی آزمایش :

 

پس از انجام مراحلی که شرح داده شد  مرفولوژی به صورت زیر دیده شد : کوکسی های تکی گرم مثبت .  

نام آزمایش :

بررسی اثر غلظت های مختلفی از برخی از مواد ضد عفونی کننده با زمان های مختلف بر روی رشد باکتری ها

 

هدف از انجام آزمایش :

 بررسی اینکه غلظت موادضد عفونی در چه زمانی روی باکتری ها  اثر می گذارد .

 

وسایل مورد نیاز :

 باکتری – ماده ضد عفونی کننده (الکل 5/12 درصد) – محیط کشت – ساعت – انکوباتور – لوپ – سم پلر

 

روش انجام کار :

 

 در ابتدا محیط کشتمان را از پشت با ماژیک به چهار قسمت تقسیم می کنیم (چون میخواهیم در چهار زمان 10،5،2،0 مورد بررسی قرار دهیم) و در هر قسمت یکی از اعداد گفته شده را قرار می دهیم .

در ادامه 5/0 سی سی از باکتری را به کمک سم پلر وارد محلول الکل 5/12 درصد میکنیم ،کمی مخلوط کرده و فورا  لوپ را وارد لوله کرده و روی محیط کشت در بازه زمانی 0 کشت می دهیم ،در ادامه دو دقیقه صبر میکنیم و سپس لوپ را داخل لوله زده وروی محیط کشت در قسمت 2 کشت میدهیم ،بعد از آن سه دقیقه صبر کرده ودوباره لوپ را داخل لوله کرده و روی محیط کشت در بخش 5 کشت می دهیم ،و در آخر پنج دقیقه صبر کرده و دوباره لوپ را وارد لوله کرده و روی محیط کشت در بخش 10 کشت می دهیم .

بعد از انجام مراحلی که گفته شد ،محیط را در انکوباتور(در دمای 37 درجه) قرار داده و پس از گذشت یک روز به محیط  کشت سر میزنیم .

 

نتیجه گیری :

 

زمان	0	2	5	10
نتیجه رشد

 

نام آزمایش :

 

اندازه گیری اسید اوریک به روش اسید فسفوتنگستیک

 

هدف از انجام آزمایش :

 

اندازه گیری اسید اوریک نمونه

 

وسایل مورد نیاز :

 

لوله های آزمایشگاهی با برچسب های B – T – S1 – S2 – S3  دستگاه شیکر – پیپت – دستگاه اسپکترو فوتومتر

 

نحوه ی انجام آزمایش :

 

در ابتدای کار به کمک جدول زیر شروع به ساخت محلول های خود می کنیم :

 

 

	B	T	S1	S2	S3
H2O	1	5/0	5/0	5/0	5/0
نمونه مجهول	--	5/0	--	--	--
استاندارد	--	--	5/0	5/0	5/0
اسید فسفوتنگستیک	5/0	5/0	5/0	5/0	5/0
کربنات سدیم 14%	1	1	1	1	1

 

 

به کمک پیپت، 1 ccاز آب مقطر را کشیده و درون لوله B  می ریزیم و سپس مقدار 0/5 cc از اسید فسفوتنگستیک و 1ccاز کربنات سدیم را نیز داخل لوله می ریزیم ، سپس برای ساخت لوله تست cc5/0 از نمونه مجهول وآب مقطر و اسید فسفوتنگستیک ومقدار 1cc از کربنات سدیم را داخل لوله Tمی ریزیم .

در ادامه کار نیاز به ساخت استاندارد داریم که به کمک جدول زیر شروع به ساخت استاندارد می کنیم :

 

 

CS=10                            

0	2	4	6	8	10
0	1	2	3	4	5	استاندارد
5	4	3	2	1	0	محلول

 

پس از ساخته شدن استاندارد ها به کمک پیپت شروع به ساخت لوله های استاندارد اصلی خود می کنیم که طبق جدول بالا در هر کدام از سه لوله 0/5cc از استاندارد وآب مقطر و اسید فسفوتنگستیک و مقدار 1cc از کربنات سدیم را می ریزیم .در ادامه لوله ها را به کمک دستگاه شیکر خوب مخلوط می کنیم و در آخرکار حدود (15-10) دقیقه در محیط آزمایشگاه قرارشون می دهیم و سپس با طول موج 710 nm  ان ها را در دستگاه اسپکترو فوتومتر قرار می دهیم .

نتیجه آزمایش :

 

               235  T=173  s1= 414  s2= 322  s3=

 

Ct3=2/94  ct2=3/22  ct1=3/34                      

     

                                       16/3=میانگین

 

 

نام آزمایش : آنتی بیوگرام یا تست بررسی حساسیت یا مقاومت باکتری مورد نظر در مقابل آنتی بیوتیک های رایج .

 

هدف از انجام آزمایش : درمان بیماران در مراکز درمانی و تشخیص باکتری در مراکز تحقیقاتی .

 

وسایل مورد نیاز : کلونی باکتری ، محیط کشت جامد(مولر هینتون آگار یا بلاد آگار) ، سوآب ، دیسکهای آنتی بیوتیک ، پنس ، شعله ، ظرف آب .

 

نحوه انجام آزمایش : در ابتدا به کمک سوآب یک کولونی از باکتری ها را برداشته ودر کنار شعله ، به گونه زیر شروع به کشت می کنیم : در ابتدا خیلی راحت سوآب را در دست گرفته و از بالا به پایین کشت می دهیم سپس در دستمان کمی محیط را می چرخانیم و دوبا ره به طور کامل کشت میدهیم ، این کار را ادامه می دهیم تا به طور کامل محیط کشت داده شود سپس در آخر کار دور محیط را نیز کشت می دهیم ، در ادامه سوآب را سوزانیده و داخل ظرف آب قرار می دهیم .

در این آزمایش ما می توانیم محیط کشتمان را باز نگه داریم چون تمامی نقاط محیط توسط باکتری ها پر شده و اجازه ورود به باکتری های هوا داده نمی شود .

در این آزمایش ما هشت نوع انتی بیوتیک انتخاب کردیم که عبارتند از :

(sxt – Gm – Fm – P – Tob – An – Ct – K )

کانا مایسین-سفتیزوکسیم-آمیکاسین-توبرا مایسین-پنی سیلین- نیتروفورانتونین-جنتامایسین- تری متوپریم(سولفامتوکسازول+تریمتوپریم).

از هر کدام از این آنتی بیوتیک ها یکی را به کمک پنس برداشته و با رعایت میزان فاصله روی محیط کشت قرار می دهیم و به کمک پنس با کمی فشار روی محیط فیکسشان می کنیم .

در انتهای کار در محیط را گذاشته و آن را در دمای 37 درجه انکوباتور قرار می دهیم و 48-24 ساعت بعد محیط را نگاه میکنیم : اگر باکتری ها زیر 2 میلی متر از کنار دیسک رشد نکردند باکتری مقاوم است ، اگر باکتری ها 4-2 میلی متر ازکنار دیسک رشد نکردند باکتری ها نیمه حساس هستند ، اگر باکتری ها بیش از 4 میلی متر از کنار دیسک رشد نکردند حساس هستند .

 

نتیجه آزمایش :

 مقاوم :PENICILIN     حساس:KANAMYCIN    حساس : AMIKASIN

حساس:CEFTIZOXIME           نیمه حساس:NITROFURANTOIN

نیمه حساس:     TOBRAMYCIN حساس:COTRIMOXAZOL

                            حساس :GENTAMYCIN

نام آزمایش : کشت استریک باکتری

 

هدف : مشاهده کلنی باکتری و بررسی مرفولوژی کلنی باکتری ها

 

وسایل مورد نیاز : سوآب– شعله-ظرف آب-محیط کشت بلاد آگار- لوپ -لوپ آنس-انکو باتور

 

روش کار :

 

ابتدا در نزدیکی  شعله جعبه محتوی سو آب را بر داشته و با دقت  کامل یکی از سوآب هارا به طوری که به دیواره و یا به هرسطح دیگر برخود نکند بر می داریم و از لوزه ها ی فرد مورد نظر نمونه برداری می کنیم سپس این نمونه را به محیط  کشت انتقال داده  و به اندازه یک سکه  پنج ریالی روی محیط پخش می کنیم سپس سوآب را آتش زده و داخل ظرف آب می اندازیم ، سپس برای پهن کردن میکروب ها  از لوپ استفاده می کنیم به طوریکه بدون  فشارآورده به محیط کشت وبه صورت زیگزاگی از محل وجود میکروب شروع به کشیدن می کنیم ، به دنبال آن چند خط مستقیم ازمحل زیگزاگ کشیده و دوباره عمل زیگزاگ را انجام می دهیم و به همین شکل می توانیم قسمتهای مختلف محیط رااز و جود میکروب پر کنیم .

پس ازعمل کشت میکروبها ظرف مخصوص محیط کشترادر انکو باتور با دمای 37 درجه قرار می دهیم ، (باید دقت کرد ظرف محیط کشت را به صورت وارونه قرار دهیم .) پس از گذشت چندین روز کولونی را از نظر حلالیت بررسی می کنیم : کولونی را در کنار آب  قرار می دهیم و شروع به بهم زدن آن می کنیم و کم کم با آب آن را مخلوط می کنیم  در صورت حل شدن کولونی ما نرم است ، که دارای کپسول بوده و بیماری زا هستند smooth))و اگر حل نشدند زبر هستند rough)).

سپس  کولونی را از نظر اندازه - رنگ - شکل هندسی - سطح - حاشیه - نوع همولیز بررسی می کنیم

نتیجه گیری :

پس  از انجام  تما می  مراحل  فوق و پس از گذشت  چندین  روز هیچ میکروبی درمحیط رشد نکرده بود ،در نتیجه تعیین مرفولوژی کلونی با مشکل مواجه شد.

نام آزمایش (1) : انجام کشت ساب کالچر

 

هدف از آزمایش : تکثیر یک باکتری خالص برای در اختیار داشتن و انجام آزمایشات مختلف.

 

وسایل مورد نیاز: میکروب کشت داده شده-لوپ-محیط کشت-انکوباتور.

 

روش انجام کار : ابتدا یک کولونی را از محیط کشت انتخاب کرده مشخصات مرفولوژی آن را نوشته و به کمک لوپ آن را بر داشته و وارد محیط کشت جدیدمان می کنیم و با حرکات زیکزاکی کولونی را در محیط پخش می کنیم .

پس از آن محیط را وارد انکوباتور می کنیم و چند روزی صبر می کنیم.

 

نتیجه آزمایش : کولونی ما در این آزمایش اشریشیا کولای بود که رنگ فلزی  داشت،یک کولونی از آن را برداشته و وارد محیط کشت کردیم و به همان صورت ذکر شده آن را کشت دادیم ولی متاسفانه دو روز پس از مراجعه هیچ میکروبی رشد نکرده بود.

 

نام آزمایش (2) : رنگ آمیزی ساده میکروب ها

 

هدف : مشاهده ی میکروب ها از نظر مرفولوژی سلولی و آرایش آن ها

 

وسایل مورد نیاز : لام – میکروب کشت داده شده – آب مقطر – لوپ – شعله –رنگ متیلن بلو – محلول لوگول – روغن ایمرسیون – میکروسکوپ –

 

روش انجام کار :

 

1- تهیه اسمیر : ابتدا به کمک لوپ یک قطره آب مقطر را روی لام قرار داده سپس لوپ را روی شعله قرار داده تا استریل گردد ، پس از سرد شدن ، یکی از کلونی های میکروب را برداشته و روی لام قرار میدهیم ،ابتدا کولونی را به هم زده سپس کم کم آن را با آب مقطر  مخلوط می کنیم و روی سطح لام پخش می کنیم .

 

2- به لام اجازه میدهیم تا خوب بخشکد.

 

3- فیکس کردن : لام را در دست گرفته و سه بار آرام از روی شعله عبور می دهیم به طوری که با این کار میکروب ها را از بین نبریم .

4- رنگ آمیزی : پس از سرد شدن لام ، آن را داخل میله های رنگ آمیزی گذاشته و چند قطره رنگ متیلن بلو روی آن می ریزیم و سه دقیقه صبر می کنیم.

 

5- شستشوی ملایم لام ها .

 

6- اضافه کردن محلول لوگول : این محلول که باعث تثبیت رنگ میشود را پس از مرحله رنگ آمیزی اضافه کرده و1  تا  2 دقیقه  صبر می کنیم وسپس آن را می شوییم .

 

7- روغن ایمر سیون را روی لام میریزیم به طوری که هیچ گونه حبابی در آن پدیدار نگردد چرا که باعث مزاحمت در مشاهده می گردد ،در ادامه لام را روی میکروسکوپ قرار داده وبه طوری که عدسی با روغن در تماس باشد و سپس اقدام به تنظیم میکروسکوپ کرده تا جایی که میکروب ها به وضوح دیده شوند.

 

نتیجه گیری : پس از طی مراحل نام برده باکتری ها به شکل کوکسی های دو تایی آبی رنگ دیده شدند.

 

نام آزمایش : اندازه گیری گلوکز به روش آنزیمی

 

هدف از آزمایش : بررسی میزان گلوکز نمونه مجهول

 

وسایل مورد نیاز : سه لوله با بر چسب  S1 - S2 - S3 _دو لوله با برچسب B وT _معرف رنگ زا _نمونه مجهول _آب مقطر _استاندارد _ سه لوله با برچسب s1-s2-s3

 

روش انجام کار :

 

	B	T	S1	S2	S3
آب مقطر	02/0	--	--	--	---
نمونه مجهول	--	02/0	--	--	--
استاندارد	--	--	02/0	02/0	02/0
معرف رنگزا	2	2	2	2	2

 

از آنجایی که طبق جدول ما باید 02/0استاندارد بسازیم و این کار از دقت بالایی بر خور دار است وگاها میسر نیست در سه لوله  s1- s2 - s3 طبق جدول زیر استاندارد سازی کرده  و سپس از این نمونه ها مقدار  02/0  را وارد  لوله های اصلی می کنیم .                           

0	50	100	150	200
0	1	2	3	4
4	3	2	1	0

                                                                     cs=200                 

 

در ادامه معرف رنگ زا را به مقدارcc2 به هر کدام از لوله های استاندارد خود اضافه می کنیم و سپس اقدام به ساخت لوله بلانک و تست خود به روش زیر می کنیم :

برای ساخت لوله بلانک 02/0 از آب مقطر وcc2 از معرف رنگ زا می ریزیم و برای ساخت لوله تست 02/0 از نمونه مجهول و  cc2  از معرف رنگ زا را در لوله می ریزیم . (لازم  به ذکر است برای کشیدن مقدار 02/0  که مقدار کمی است از وسیله ای به نام سم پلر استفاده می کنیم .)

بعد از ساخت  لوله ها آن ها را به کمک دستگاه  شیکر مخلوط  کرده و بعد از ده دقیقه  ماندن در حرارت 37  درجه یا همان حرارت آزمایشگاه به سراغ  دستگاه اسپکترو فوتومتری می رویم : این دستگاه از دو قسمت اسپکترو متر و فوتو متر تشکیل شده است وبرای اندازه گیری غلظت ماده رنگی به کار می رود ،اسپکترو متر نور ثابت را با  طول  موج  دلخواه به وجود می آورد ، پس از عبور نور از محلول ، نور باقی مانده به  قسمت نور سنجی  یا  فوتو متر می رود و نور را به سیگنال الکتریکی   تبدیل می کند ، سپس سیگنال های تشکیل شده اندازه گیری  و پردازش میشوند تا کمیت به دست آ ید.

 

دستگاه را روی طول موج 530- 510 گذاشته ولوله بلانک را داخل دستگاه می گذاریم و دستگاه را صفر می کنیم ( کل نور تابیده شده به لوله خارج گشته و جذبی صورت نمی گیرد.)

 

اعداد به دست آمده از این آزمایش عبارتند از :

 S1=           S2=         S3=          S4=          T=                    

 

           Ct1=         ct2=         ct3=          ct4=          

                                                     =میانگین

 

- نام آزمایش :

1- تست تشخیص آزمایشگاهی استافیلو کوکسی ها از سایر کوکسی های گرم مثبت

 2- تست تشخیص افتراقی استافیلو کوکوس اورئوس ازسایراستافیلوکوکوسهای غیر بیماری زا

 

- هدف از انجام آزمایش :

1- تشخیص استافیلو کوکوس از سایر کوکسی های گرم مثبت

2- تشخیص استافیلو کوکوس اورئوس از استافیلو کوکوس های غیر بیماری زا

- وسایل مورد نیاز :

لام – آب اکسیژنه – آب – کلونی باکتری – پلاسما – چراغ _ لوپ

روش انجام کار :

- آزمایش (1) :

 در ابتدا یک لام بر داشته و یک طرف آن را یک  قطره آب اکسیژنه و طرف دیگر آن را  یک قطره آب  معمولی می گذاریم ، سپس از کلونی مورد نظر به کمک لوپ یک کلونی جدا کرده و در آب حل میکنیم (که  به عنوان شاهد ما در نظر گرفته می شود ) ، در ادامه یک کولونی  دیگر برداشته و در آب اکسیژنه حل می کنیم .

در صورتی  که  میکروب ما استافیلو کوک باشد  با کمک  آنزیم  کاتالاز خود H2O2  را بهH2O + O2  تبدیل می کند ، که این واکنش خود رابه صورت کف نشان می دهد .

- نتیجه (1) :

پس از انجام مراحل فوق ، با مشاهده ی کف کردن کلونی درآب اکسیژنه ،پی به استافیلو کوک بودن کلونی بردیم.

- آزمایش(2) :

 در این آزمایش با مشخص شدن استافیلو کوک  بودن نمونه ، می خواهیم پی به بیماری زا بودن یا نبودن آن ببریم :

در ابتدا مقداری از پلاسما را در وسط لام خود ریخته و در ادامه یک کولونی از باکتری را  درون  آن حل  می کنیم  ، سپس لام را  در زیر چراغ  می بینیم ، از

آنجایی که استافیلو کوک اورئوس بیماری  زا است  ودارای آنزیم کوآگولازمثبت است ، باعث لخته شدن پلاسما می شود وازاین طریق می توان پی به بیماری زا بودن نمونه ببریم.

- نتیجه(2) :

 پس  از انجام  مراحل  فوق ، لام  در زیر چراغ  دارای دانه های ریزی شد که پیوسته به مقدارآن ها افزوده می شد ، پس نتیجه گرفتیم  نمونه  ما استافیلو کوک اورئوس بوده است و دانه ها حکایت از لخته شدن پلاسما می کنند .